1. 項目背景
血栓調節蛋白（thrombomodulin，TM）是1981年首次由Esmon等從兔肺中分離提取的一種促進凝血酶活化蛋白C的輔助因子。
急性出血性凝血功能障礙診治專家共識（2020）》指出：血栓調節蛋白(Thrombomodulin, TM) 為內皮細胞表面的凝血酶受體，抑制凝血酶的活性，增強蛋白C活化性能，血漿TM正常值為3.8～13.3 TU/mL。當內皮細胞受損或功能障礙時，TM表達降低，部分TM被蛋白酶水解至血漿中。因此，TM是內皮細胞受損的標志物。TM升高提示血管內皮損傷，可見于膿毒癥、腎功能受損、急性肺損傷等。下圖是血栓分子標志物在血栓形成路徑中的作用機制。
血栓分子標志物在血栓形成路徑中的作用機制
2. 性能表現
針對血栓調節蛋白的檢測，西寶生物推出4種單克隆抗體及1種抗原。具體性能如下（以下評估僅代表在西寶生物的工藝體系下的驗證，建議客戶根據自身工藝進行抗體交叉配對驗證）。
2.1 化學發光（AE）平臺：
組合1（兩試劑模式）：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）包被羧基磁珠+血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0941C）標記吖啶酯；
組合2（三試劑模式）：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）標記生物素+血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0941C）標記吖啶酯+鏈酶親和素磁珠（SA）（貨號：DEG0814A）；
線性范圍：1 TU/mL-200 TU/mL；最低檢出限：1 TU/mL。
樣本濃度值在3500 TU/mL以內沒有發現高劑量鉤狀效應(HOOK效應)。
2.2 化學發光（AP）平臺：
組合3（兩試劑模式）：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）包被羧基磁珠+血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0941C）標記堿性磷酸酶；
組合4（三試劑模式）：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）標記生物素+血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0941C）標記堿性磷酸酶+鏈酶親和素磁珠（SA）
（貨號：DEG0814A）；
線性范圍：1 TU/mL-200 TU/mL；最低檢出限：1 TU/mL。
樣本濃度值在3500 TU/mL以內沒有發現高劑量鉤狀效應(HOOK效應)。
化學發光（吖啶酯）平臺-三試劑組合校準曲線
化學發光（吖啶酯）平臺-三試劑組合校準曲線
3.臨床相關性
3.1 化學發光（AE）平臺：
西寶生物發光（AE）平臺TM抗體配對組合1（兩試劑模式）與希森美康 TM試劑（化學發光法）賦值的臨床樣本相關性R2>0.95，相關性良好；
西寶生物發光（AE）平臺TM抗體配對組合2（三試劑模式）與希森美康 TM試劑（化學發光法）賦值的臨床樣本相關性R2>0.95，相關性良好。
3.2 化學發光（AP）平臺：
西寶生物發光（AP）平臺TM抗體配對組合3（兩試劑模式）與希森美康 TM試劑（化學發光法）賦值的臨床樣本相關性R2>0.95，相關性良好；
西寶生物發光（AP）平臺TM抗體配對組合4（三試劑模式）與希森美康 TM試劑（化學發光法）賦值的臨床樣本相關性R2>0.95，相關性良好。
4.測試方案
4.1 化學發光（AE）平臺
4.1.1抗體配對組合1（兩試劑模式）：
待測抗原:血栓調節蛋白（TM）抗原（貨號：EDD0760A）
樣本/校準品:加樣量50ul；
試劑1：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測試；
試劑2：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0941C）標記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測試；
反應條件：
第一步：50ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入預激發液及激發液，進行測試。
4.1.2 抗體配對組合2（三試劑模式）：
待測抗原:血栓調節蛋白（TM）抗原（貨號：EDD0760A）
樣本/校準品:加樣量50ul；
M試劑：鏈酶親和素磁珠（SA）（貨號：DEG0814A）稀釋物，用量50ul/測試；
試劑1：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）標記-生物素稀釋物，用量50ul/測試；
試劑2：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0941C）標記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測試；
反應條件：第一步：50ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育9min；
第二步：加入50ul M試劑混合，37℃孵育9min，清洗；
第三步：加入預激發液及激發液，進行測試。
測試使用發光儀器:科斯邁SMART 500S。
4.2 抗體配對組合2（三試劑模式）：
4.2.1 抗體配對組合3（兩試劑模式）：
待測抗原:血栓調節蛋白（TM）抗原（貨號：EDD0760A）
樣本/校準品:加樣量10ul；
試劑1：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測試；
試劑2：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0941C）標記-堿性磷酸酶稀釋物，用量50ul/測試；
反應條件：
第一步：10ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入底物，進行測試。
4.2.2 抗體配對組合4（三試劑模式）：
待測抗原:血栓調節蛋白（TM）抗原（貨號：EDD0760A）
樣本/校準品:加樣量10ul；
M試劑：鏈酶親和素磁珠（SA）（貨號：DEG0814A）稀釋物，用量50ul/測試；
試劑1：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）標記-生物素稀釋物，用量50ul/測試；
試劑2：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0941C）標記-堿性磷酸酶稀釋物，用量50ul/測試；
反應條件：
第一步：10ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育5min；
第二步：加入50ul M試劑混合，37℃孵育5min，清洗；
第三步：加入底物，進行測試。
測試使用發光儀器:迎凱Shine i2900。
5.產品信息
產品名稱 | 貨號 | 推薦配對 |
血栓調節蛋白（TM）抗體 | EKY0940C | 血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）包被羧基磁珠+血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0941C）標記吖啶酯（發光兩試劑配對組合1） 鏈霉親和素磁性微球（貨號：DEG0814A）+血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）標記生物素+血栓調節蛋白（TM）抗體貨號：EKY0941C）標記吖啶酯（發光三試劑配對組合2） 血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）包被羧基磁珠+血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0941C）標記堿性磷酸酶（發光兩試劑配對組合3） 鏈霉親和素磁性微球（貨號：DEG0814A）+血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）標記生物素+血栓調節蛋白（TM）抗體貨號：EKY0941C）標記堿性磷酸酶（發光三試劑配對組合4） |
血栓調節蛋白（TM）抗體 | EKY0941C | |
血栓調節蛋白（TM）抗體 | EKY0940D | |
血栓調節蛋白（TM）抗體 | EKY0941D | |
血栓調節蛋白（TM）抗原 | EDD0760A | |
血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）-羧基磁珠濃縮液 | DKY1326A | |
血栓調節蛋白（TM）抗體（EKY0941C） -吖啶酯濃縮液 | DKY1326B | |
血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）-生物素濃縮液 | DKY1326C | |
血栓調節蛋白（TM）抗體（EKY0941C） -堿性磷酸酶濃縮液 | DKY1326D | |
羧基磁性微球，1.5um | DEG0800C | |
鏈霉親和素磁性微球，1.5um | DEG0814A-10ml | |
AMPPD 發光底物液（即用型） | DCD0517A | |
AMPPD 發光底物液（即用型） | DCD0517B |
1. 項目背景
血栓調節蛋白（thrombomodulin，TM）是1981年首次由Esmon等從兔肺中分離提取的一種促進凝血酶活化蛋白C的輔助因子。
急性出血性凝血功能障礙診治專家共識（2020）》指出：血栓調節蛋白(Thrombomodulin, TM) 為內皮細胞表面的凝血酶受體，抑制凝血酶的活性，增強蛋白C活化性能，血漿TM正常值為3.8～13.3 TU/mL。當內皮細胞受損或功能障礙時，TM表達降低，部分TM被蛋白酶水解至血漿中。因此，TM是內皮細胞受損的標志物。TM升高提示血管內皮損傷，可見于膿毒癥、腎功能受損、急性肺損傷等。下圖是血栓分子標志物在血栓形成路徑中的作用機制。
血栓分子標志物在血栓形成路徑中的作用機制
2. 性能表現
針對血栓調節蛋白的檢測，西寶生物推出4種單克隆抗體及1種抗原。具體性能如下（以下評估僅代表在西寶生物的工藝體系下的驗證，建議客戶根據自身工藝進行抗體交叉配對驗證）。
2.1 化學發光（AE）平臺：
組合1（兩試劑模式）：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）包被羧基磁珠+血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0941C）標記吖啶酯；
組合2（三試劑模式）：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）標記生物素+血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0941C）標記吖啶酯+鏈酶親和素磁珠（SA）（貨號：DEG0814A）；
線性范圍：1 TU/mL-200 TU/mL；最低檢出限：1 TU/mL。
樣本濃度值在3500 TU/mL以內沒有發現高劑量鉤狀效應(HOOK效應)。
2.2 化學發光（AP）平臺：
組合3（兩試劑模式）：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）包被羧基磁珠+血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0941C）標記堿性磷酸酶；
組合4（三試劑模式）：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）標記生物素+血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0941C）標記堿性磷酸酶+鏈酶親和素磁珠（SA）
（貨號：DEG0814A）；
線性范圍：1 TU/mL-200 TU/mL；最低檢出限：1 TU/mL。
樣本濃度值在3500 TU/mL以內沒有發現高劑量鉤狀效應(HOOK效應)。
化學發光（吖啶酯）平臺-三試劑組合校準曲線
化學發光（吖啶酯）平臺-三試劑組合校準曲線
3.臨床相關性
3.1 化學發光（AE）平臺：
西寶生物發光（AE）平臺TM抗體配對組合1（兩試劑模式）與希森美康 TM試劑（化學發光法）賦值的臨床樣本相關性R2>0.95，相關性良好；
西寶生物發光（AE）平臺TM抗體配對組合2（三試劑模式）與希森美康 TM試劑（化學發光法）賦值的臨床樣本相關性R2>0.95，相關性良好。
3.2 化學發光（AP）平臺：
西寶生物發光（AP）平臺TM抗體配對組合3（兩試劑模式）與希森美康 TM試劑（化學發光法）賦值的臨床樣本相關性R2>0.95，相關性良好；
西寶生物發光（AP）平臺TM抗體配對組合4（三試劑模式）與希森美康 TM試劑（化學發光法）賦值的臨床樣本相關性R2>0.95，相關性良好。
4.測試方案
4.1 化學發光（AE）平臺
4.1.1抗體配對組合1（兩試劑模式）：
待測抗原:血栓調節蛋白（TM）抗原（貨號：EDD0760A）
樣本/校準品:加樣量50ul；
試劑1：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測試；
試劑2：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0941C）標記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測試；
反應條件：
第一步：50ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入預激發液及激發液，進行測試。
4.1.2 抗體配對組合2（三試劑模式）：
待測抗原:血栓調節蛋白（TM）抗原（貨號：EDD0760A）
樣本/校準品:加樣量50ul；
M試劑：鏈酶親和素磁珠（SA）（貨號：DEG0814A）稀釋物，用量50ul/測試；
試劑1：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）標記-生物素稀釋物，用量50ul/測試；
試劑2：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0941C）標記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測試；
反應條件：
第一步：50ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育9min；
第二步：加入50ul M試劑混合，37℃孵育9min，清洗；
第三步：加入預激發液及激發液，進行測試。
測試使用發光儀器:科斯邁SMART 500S。
4.2 抗體配對組合2（三試劑模式）：
4.2.1 抗體配對組合3（兩試劑模式）：
待測抗原:血栓調節蛋白（TM）抗原（貨號：EDD0760A）
樣本/校準品:加樣量10ul；
試劑1：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測試；
試劑2：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0941C）標記-堿性磷酸酶稀釋物，用量50ul/測試；
反應條件：
第一步：10ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入底物，進行測試。
4.2.2 抗體配對組合4（三試劑模式）：
待測抗原:血栓調節蛋白（TM）抗原（貨號：EDD0760A）
樣本/校準品:加樣量10ul；
M試劑：鏈酶親和素磁珠（SA）（貨號：DEG0814A）稀釋物，用量50ul/測試；
試劑1：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）標記-生物素稀釋物，用量50ul/測試；
試劑2：血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0941C）標記-堿性磷酸酶稀釋物，用量50ul/測試；
反應條件：
第一步：10ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育5min；
第二步：加入50ul M試劑混合，37℃孵育5min，清洗；
第三步：加入底物，進行測試。
測試使用發光儀器:迎凱Shine i2900。
5.產品信息
產品名稱 | 貨號 | 推薦配對 |
血栓調節蛋白（TM）抗體 | EKY0940C | 血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）包被羧基磁珠+血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0941C）標記吖啶酯（發光兩試劑配對組合1） 鏈霉親和素磁性微球（貨號：DEG0814A）+血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）標記生物素+血栓調節蛋白（TM）抗體貨號：EKY0941C）標記吖啶酯（發光三試劑配對組合2） 血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）包被羧基磁珠+血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0941C）標記堿性磷酸酶（發光兩試劑配對組合3） 鏈霉親和素磁性微球（貨號：DEG0814A）+血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）標記生物素+血栓調節蛋白（TM）抗體貨號：EKY0941C）標記堿性磷酸酶（發光三試劑配對組合4） |
血栓調節蛋白（TM）抗體 | EKY0941C | |
血栓調節蛋白（TM）抗體 | EKY0940D | |
血栓調節蛋白（TM）抗體 | EKY0941D | |
血栓調節蛋白（TM）抗原 | EDD0760A | |
血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）-羧基磁珠濃縮液 | DKY1326A | |
血栓調節蛋白（TM）抗體（EKY0941C） -吖啶酯濃縮液 | DKY1326B | |
血栓調節蛋白（TM）抗體（貨號：EKY0940C）-生物素濃縮液 | DKY1326C | |
血栓調節蛋白（TM）抗體（EKY0941C） -堿性磷酸酶濃縮液 | DKY1326D | |
羧基磁性微球，1.5um | DEG0800C | |
鏈霉親和素磁性微球，1.5um | DEG0814A-10ml | |
AMPPD 發光底物液（即用型） | DCD0517A | |
AMPPD 發光底物液（即用型） | DCD0517B |
