1.項目背景
糖類抗原15-3(CA15-3)是粘蛋白1（Mucin1或MUC1）經水解后的一種可溶形式。
《乳腺癌診療指南（2022）》指出：CA15-3、癌胚抗原是乳腺癌中應用價值較高的腫瘤標志物，主要用于轉移性乳腺癌患者的病程監測。CA15-3和癌胚抗原聯合應用可顯著提高檢測腫瘤復發和轉移的敏感性。由于其對局部病變的敏感性低，且在某些良性疾病和其他器官的惡性腫瘤中也可升高，因此不適合用于乳腺癌的篩查和診斷。有研究表明，CA15-3項目可用于輔助II期和III期乳腺癌患者的監控。對患者進行連續檢測得到的CA15-3檢測值應與其他臨床方法聯合用于監控乳腺癌。
性能表現（化學發光（吖啶酯）平臺）
2.1 抗體配對組合：
糖類抗原CA15-3單克隆抗體（貨號：EKY0017I）包被羧基磁珠+糖類抗原CA15-3單克隆抗體（貨號：EKY0017J）標記吖啶酯；
2.2 具體指標
參考《YY/T 1176-2010 癌抗原CA15-3定量測定試劑（盒）（化學發光免疫分析法）》
a 最低檢出限：不高于1.0 U/mL。
用零濃度校準品或樣本稀釋液作為樣本進行檢測，重復測定20次，得出20次測量結果的RLU值(相對發光值)，計算其平均值(M)和標準差(sD)，得出M+2SD，根據零濃度校準品和相鄰校準品之間的濃度一RLU值結果進行兩點回歸擬合得出一次方程，將M+2SD的RLU值帶入上述方程中，求出對應的濃度值，即為最低檢測限。
CA15-3 最低檢出限 | ||
空白樣本 （n=20） | 發光值 | |
1 | 697 | |
2 | 726 | |
3 | 638 | |
4 | 668 | |
5 | 677 | |
6 | 639 | |
7 | 638 | |
8 | 683 | |
9 | 715 | |
10 | 689 | |
11 | 693 | |
12 | 713 | |
13 | 676 | |
14 | 635 | |
15 | 723 | |
16 | 693 | |
17 | 697 | |
18 | 625 | |
19 | 748 | |
20 | 680 | |
Mean | 683 | |
SD | 34 | |
M+2SD | 751 | |
9.2 U/mL | 1 | 17283 |
2 | 18901 | |
3 | 18980 | |
Mean | 18388 | |
最低檢出限 U/mL | 0.03 | |
b 重復性：分別為1.9%及2.6%
用 30U/mL±6U/mL和 150U/mL±30U/mL的樣本各重復檢測10次，計算10次測量結果的平均值M和標準差SD，根據公式CV=SD/M*100％得出變異系數CV。其變異系數(CV)應不大
于10％(儀器自動操作法)或不大于15％(手工操作法)。
CA15-3 重復性 | ||||
序號 | 發光值 | 濃度值U/mL | 發光值 | 濃度值U/mL |
1 | 52225 | 31.74 | 217968 | 162.60 |
2 | 50512 | 30.63 | 212318 | 157.25 |
3 | 49512 | 29.98 | 215140 | 159.91 |
4 | 50515 | 30.63 | 224639 | 169.02 |
5 | 51016 | 30.95 | 219351 | 163.92 |
6 | 50336 | 30.51 | 224923 | 169.29 |
7 | 49061 | 29.69 | 218999 | 163.59 |
8 | 50503 | 30.62 | 211526 | 156.51 |
9 | 49790 | 30.16 | 218945 | 163.53 |
10 | 50802 | 30.82 | 218211 | 162.83 |
M | 50427 | 30.57 | 218202 | 162.85 |
SD | 873 | 0.57 | 4443.91 | 4.24 |
CV | 1.7% | 1.9% | 2.0% | 2.6% |
c 線性范圍： 1 U/mL- 至少200U/mL。
將接近線性范圍上限的高值樣本按一定比例稀釋為至少5種濃度，其中低值濃度的樣本須接近線性范圍的下限。按試劑(盒)說明書進行操作，每一濃度重復檢測2次，計算平均值，將結果平均值和稀釋比例用最小二乘法進行直線擬合，并計算線性相關系數r。
線性范圍上限不應低于參考值的5倍，下限應低于參考值的1/5（參考羅氏CA19-9參考值為26.4 U/mL (第95百分位數)、28.5 U/mL (第97.5百分位數)、34.5 U/mL (第99百分位數)）。在生產企業所規定的線性范圍內，試劑(盒)的相關系數r應≥0.99。
CA15-3 線性 | ||
線性 | 實測值均值U/mL | 理論值U/mL |
線性1 | 0.40 | 0.20 |
線性2 | 1.53 | 0.81 |
線性3 | 5.64 | 3.22 |
線性4 | 18.36 | 12.90 |
線性5 | 58.13 | 51.58 |
線性6 | 206.33 | 206.33 |
線性相關系數r | 0.9994 | |
d 回收率：88.5%。
將濃度約為200U/mL(允許偏差為±20％)的癌抗原CA15-3樣品(A)加入血清或其他相應的基質樣品B中，所加入A的體積宜不超過總體積（A+B）的10%。
回收率應在(85％～115%)范圍內。
序號 | 混合樣本U/mL | 低值樣本U/mL | 高值樣本U/mL |
1 | 25.60 | 11.93 | 166.37 |
2 | 25.08 | 11.60 | 175.66 |
3 | 25.92 | 11.90 | 162.97 |
均值 | 25.53 | 11.81 | 168.33 |
回收率 | 88.5% | ||
3.臨床相關性（化學發光（吖啶酯）平臺）
西寶生物發光平臺CA15-3抗體配對與Roche CA15-3試劑賦值的臨床樣本（高值部分）相關性R²>0.94，相關性良好；低值部分（≤60 U/mL）相關性R²>0.90，相關性同樣較好。
4.測試方案
特別注明：
1）若客戶采用吖啶酯體系，建議CA15-3抗體與吖啶酯的標記摩爾比在1:4左右；
2）若客戶采用堿性磷酸酶或辣根過氧化物酶體系，建議優化酶與抗體標記的摩爾比例。
待測樣本:預稀釋樣本加樣量20ul；采用合適的稀釋液將樣本稀釋10倍；
試劑1：糖類抗原CA15-3單克隆抗體（貨號：EKY0017I）-磁珠稀釋物，用量50ul/測試；
試劑2：糖類抗原CA15-3單克隆抗體（貨號：EKY0017J）-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測試；
反應條件：
第一步：20ul預稀釋樣本（10倍稀釋）+50ul試劑1混合，37℃孵育9min，清洗；
第二步：加入50ul試劑2混合，37℃孵育9min，清洗；
第三步：加入預激發液及激發液，進行測試。
測試使用發光儀器:科斯邁SMART 500S；可適用于各類吖啶酯體系的化學發光儀器（如四川邁克、深圳亞輝龍、山東康華生物、基蛋生物、南京諾爾曼等）
5.產品信息(可提供大包裝試劑)
貨號 | 推薦配對 | |
糖類抗原CA15-3單克隆抗體 | EKY0017I | 糖類抗原CA15-3單克隆抗體（貨號：EKY0017I）包被羧基磁珠+糖類抗原CA15-3單克隆抗體（貨號：EKY0017J）標記吖啶酯（抗體配對組合） |
糖類抗原CA15-3單克隆抗體 | EKY0017J | |
糖類抗原CA15-3單克隆抗體（貨號：EKY0017I）-羧基磁珠濃縮液 | DKY1319A | |
糖類抗原CA15-3單克隆抗體（貨號：EKY0017J）-吖啶酯濃縮液 | DKY1319B | |
羧基磁珠(超順磁)，1um | DEG0091B-1-100mg | |
羧基磁珠(超順磁)，3um | DEG0091A-3-100mg |
西寶生物同時提供體外診斷IVD平臺工藝開發技術服務，點擊了解。
1.項目背景
糖類抗原15-3(CA15-3)是粘蛋白1（Mucin1或MUC1）經水解后的一種可溶形式。
《乳腺癌診療指南（2022）》指出：CA15-3、癌胚抗原是乳腺癌中應用價值較高的腫瘤標志物，主要用于轉移性乳腺癌患者的病程監測。CA15-3和癌胚抗原聯合應用可顯著提高檢測腫瘤復發和轉移的敏感性。由于其對局部病變的敏感性低，且在某些良性疾病和其他器官的惡性腫瘤中也可升高，因此不適合用于乳腺癌的篩查和診斷。有研究表明，CA15-3項目可用于輔助II期和III期乳腺癌患者的監控。對患者進行連續檢測得到的CA15-3檢測值應與其他臨床方法聯合用于監控乳腺癌。
性能表現（化學發光（吖啶酯）平臺）
2.1 抗體配對組合：
糖類抗原CA15-3單克隆抗體（貨號：EKY0017I）包被羧基磁珠+糖類抗原CA15-3單克隆抗體（貨號：EKY0017J）標記吖啶酯；
2.2 具體指標
參考《YY/T 1176-2010 癌抗原CA15-3定量測定試劑（盒）（化學發光免疫分析法）》
a 最低檢出限：不高于1.0 U/mL。
用零濃度校準品或樣本稀釋液作為樣本進行檢測，重復測定20次，得出20次測量結果的RLU值(相對發光值)，計算其平均值(M)和標準差(sD)，得出M+2SD，根據零濃度校準品和相鄰校準品之間的濃度一RLU值結果進行兩點回歸擬合得出一次方程，將M+2SD的RLU值帶入上述方程中，求出對應的濃度值，即為最低檢測限。
CA15-3 最低檢出限 | ||
空白樣本 （n=20） | 發光值 | |
1 | 697 | |
2 | 726 | |
3 | 638 | |
4 | 668 | |
5 | 677 | |
6 | 639 | |
7 | 638 | |
8 | 683 | |
9 | 715 | |
10 | 689 | |
11 | 693 | |
12 | 713 | |
13 | 676 | |
14 | 635 | |
15 | 723 | |
16 | 693 | |
17 | 697 | |
18 | 625 | |
19 | 748 | |
20 | 680 | |
Mean | 683 | |
SD | 34 | |
M+2SD | 751 | |
9.2 U/mL | 1 | 17283 |
2 | 18901 | |
3 | 18980 | |
Mean | 18388 | |
最低檢出限 U/mL | 0.03 | |
b 重復性：分別為1.9%及2.6%
用 30U/mL±6U/mL和 150U/mL±30U/mL的樣本各重復檢測10次，計算10次測量結果的平均值M和標準差SD，根據公式CV=SD/M*100％得出變異系數CV。其變異系數(CV)應不大
于10％(儀器自動操作法)或不大于15％(手工操作法)。
CA15-3 重復性 | ||||
序號 | 發光值 | 濃度值U/mL | 發光值 | 濃度值U/mL |
1 | 52225 | 31.74 | 217968 | 162.60 |
2 | 50512 | 30.63 | 212318 | 157.25 |
3 | 49512 | 29.98 | 215140 | 159.91 |
4 | 50515 | 30.63 | 224639 | 169.02 |
5 | 51016 | 30.95 | 219351 | 163.92 |
6 | 50336 | 30.51 | 224923 | 169.29 |
7 | 49061 | 29.69 | 218999 | 163.59 |
8 | 50503 | 30.62 | 211526 | 156.51 |
9 | 49790 | 30.16 | 218945 | 163.53 |
10 | 50802 | 30.82 | 218211 | 162.83 |
M | 50427 | 30.57 | 218202 | 162.85 |
SD | 873 | 0.57 | 4443.91 | 4.24 |
CV | 1.7% | 1.9% | 2.0% | 2.6% |
c 線性范圍： 1 U/mL- 至少200U/mL。
將接近線性范圍上限的高值樣本按一定比例稀釋為至少5種濃度，其中低值濃度的樣本須接近線性范圍的下限。按試劑(盒)說明書進行操作，每一濃度重復檢測2次，計算平均值，將結果平均值和稀釋比例用最小二乘法進行直線擬合，并計算線性相關系數r。
線性范圍上限不應低于參考值的5倍，下限應低于參考值的1/5（參考羅氏CA19-9參考值為26.4 U/mL (第95百分位數)、28.5 U/mL (第97.5百分位數)、34.5 U/mL (第99百分位數)）。在生產企業所規定的線性范圍內，試劑(盒)的相關系數r應≥0.99。
CA15-3 線性 | ||
線性 | 實測值均值U/mL | 理論值U/mL |
線性1 | 0.40 | 0.20 |
線性2 | 1.53 | 0.81 |
線性3 | 5.64 | 3.22 |
線性4 | 18.36 | 12.90 |
線性5 | 58.13 | 51.58 |
線性6 | 206.33 | 206.33 |
線性相關系數r | 0.9994 | |
d 回收率：88.5%。
將濃度約為200U/mL(允許偏差為±20％)的癌抗原CA15-3樣品(A)加入血清或其他相應的基質樣品B中，所加入A的體積宜不超過總體積（A+B）的10%。
回收率應在(85％～115%)范圍內。
序號 | 混合樣本U/mL | 低值樣本U/mL | 高值樣本U/mL |
1 | 25.60 | 11.93 | 166.37 |
2 | 25.08 | 11.60 | 175.66 |
3 | 25.92 | 11.90 | 162.97 |
均值 | 25.53 | 11.81 | 168.33 |
回收率 | 88.5% | ||
3.臨床相關性（化學發光（吖啶酯）平臺）
西寶生物發光平臺CA15-3抗體配對與Roche CA15-3試劑賦值的臨床樣本（高值部分）相關性R²>0.94，相關性良好；低值部分（≤60 U/mL）相關性R²>0.90，相關性同樣較好。
4.測試方案
特別注明：
1）若客戶采用吖啶酯體系，建議CA15-3抗體與吖啶酯的標記摩爾比在1:4左右；
2）若客戶采用堿性磷酸酶或辣根過氧化物酶體系，建議優化酶與抗體標記的摩爾比例。
待測樣本:預稀釋樣本加樣量20ul；采用合適的稀釋液將樣本稀釋10倍；
試劑1：糖類抗原CA15-3單克隆抗體（貨號：EKY0017I）-磁珠稀釋物，用量50ul/測試；
試劑2：糖類抗原CA15-3單克隆抗體（貨號：EKY0017J）-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測試；
反應條件：
第一步：20ul預稀釋樣本（10倍稀釋）+50ul試劑1混合，37℃孵育9min，清洗；
第二步：加入50ul試劑2混合，37℃孵育9min，清洗；
第三步：加入預激發液及激發液，進行測試。
測試使用發光儀器:科斯邁SMART 500S；可適用于各類吖啶酯體系的化學發光儀器（如四川邁克、深圳亞輝龍、山東康華生物、基蛋生物、南京諾爾曼等）
5.產品信息(可提供大包裝試劑)
貨號 | 推薦配對 | |
糖類抗原CA15-3單克隆抗體 | EKY0017I | 糖類抗原CA15-3單克隆抗體（貨號：EKY0017I）包被羧基磁珠+糖類抗原CA15-3單克隆抗體（貨號：EKY0017J）標記吖啶酯（抗體配對組合） |
糖類抗原CA15-3單克隆抗體 | EKY0017J | |
糖類抗原CA15-3單克隆抗體（貨號：EKY0017I）-羧基磁珠濃縮液 | DKY1319A | |
糖類抗原CA15-3單克隆抗體（貨號：EKY0017J）-吖啶酯濃縮液 | DKY1319B | |
羧基磁珠(超順磁)，1um | DEG0091B-1-100mg | |
羧基磁珠(超順磁)，3um | DEG0091A-3-100mg |
西寶生物同時提供體外診斷IVD平臺工藝開發技術服務，點擊了解。
