1.項目背景    

摘自《人偏肺病毒感染診療方案（2023年版）》    

人偏肺病毒感染是人體感染人偏肺病毒（humanmetapneumovirus，hMPV）后引起的一種急性呼吸道傳染病，全年散發，多發生于冬末及春初。hMPV感染大多表現為輕度自限性疾病，部分患者因出現毛細支氣管炎、肺炎、慢性阻塞性肺疾病（COPD）急性加重和支氣管哮喘急性發作等并發癥需要住院治療，免疫功能低下者可進展為重癥肺炎，出現急性呼吸窘迫綜合征（ARDS）或多器官功能不全等，甚至導致死亡。

1.1 病原學    

hMPV屬于肺炎病毒科，偏肺病毒屬，為有包膜的單股負鏈RNA病毒，平均直徑大約200nm。hMPV包括A和B兩個基因型，可分為A1、A2、B1、B2四個亞型，這些亞型常常同時流行，各亞型病毒傳播力和致病性未見明顯差別。

hMPV對熱敏感，60℃ 30分鐘可滅活；對乙醚、氯仿等有機溶劑敏感；1%次氯酸鈉等含氯消毒劑、5%福爾馬林、2%戊二醛、1%碘伏等常用消毒劑可滅活病毒；對0.1%脫氧膽酸鈉、十二烷基硫酸鈉（SDS）和曲拉通X-100（TritonX-100）等去污劑敏感。

1.2 臨床表現    

潛伏期3-9天，多為3-6天。

多表現為上呼吸道感染癥狀，如發熱、咳嗽、鼻塞、流涕、聲音嘶啞等，約1周左右癥狀逐漸緩解。病情嚴重者可出現毛細支氣管炎、重癥肺炎和ARDS，COPD患者感染后病情可加重，支氣管哮喘患者可誘發急性發作。嚴重下呼吸道感染多見于幼兒、老年人等人群。肺移植、造血干細胞移植等免疫功能低下人群感染后癥狀更重，病死率也相對較高。

1.3 實驗室及影像學檢查    

a.病毒核酸檢測：采集呼吸道標本（鼻咽拭子、咽拭子、痰液、支氣管肺泡灌洗液等）采用熒光定量PCR、病毒基因測序等方法檢測hMPV核酸。核酸檢測的敏感性和特異性高。

b.病毒抗原檢測：酶免疫法、膠體金法和免疫熒光法等方法檢測呼吸道標本中hMPV抗原，但病毒抗原檢測陰性不能除外診斷。

c.病毒培養分離：從呼吸道標本培養分離hMPV。

d.血清學檢測：檢測血清中特異性IgM抗體和IgG抗體，IgM抗體檢測敏感性和特異性較低。

2.測試方案及性能表現    

針對人偏肺病毒（hMPV）抗原的檢測，西寶生物推出2種單克隆抗體和1種抗原，適合膠體金免疫層析、彩色乳膠免疫層析及熒光免疫層析平臺。具體性能如下。

（以下評估僅代表在西寶生物的工藝體系下的驗證，建議客戶根據自身工藝進行抗體交叉配對驗證）。    

2.1 膠體金免疫層析平臺    

2.1.1 抗體配對組合1：人偏肺病毒 (hMPV)抗體（貨號：FKY0936D）標記膠體金+人偏肺病毒 (hMPV)抗體（貨號：FKY0936C）劃膜；    

2.1.2 人偏肺病毒（HMPV）M抗原（貨號：EDD0812A）用合適的稀釋液按照理論濃度依次稀釋到50ng/mL、10ng/mL、1ng/mL、0.5ng/mL、0.2ng/mL、0.1ng/mL、0.05ng/mL。

2.1.3 反應模式：80uL樣品直接上樣，反應時間15min-20min；

2.1.4 實驗結果：在膠體金免疫層析平臺，采用此抗體配對組合1測試HMPV M抗原稀釋梯度均顯色，靈敏度可達0.05ng/mL。該實驗結果表明此抗體配對在膠體金層析平臺測試性能良好。

膠體金層析平臺測試抗原梯度示意圖

2.1.5 特異性：分別測試濃度為10ug/mL的腺病毒抗原、合胞病毒抗原、2019-nCOV-SRFc3cho抗原、2019-nCOV-SRHcho抗原，結果均為陰性，表明特異性良好。

膠體金層析平臺測試特異性示意圖

2.2 彩色乳膠免疫層析平臺    

2.2.1 抗體配對組合2：人偏肺病毒 (hMPV)抗體（貨號：FKY0936D）標記彩色乳膠+人偏肺病毒 (hMPV)抗體（貨號：FKY0936C）劃膜；

2.2.2 人偏肺病毒（HMPV）M抗原（貨號：EDD0812A）用合適的稀釋液按照理論濃度依次稀釋到50ng/mL、10ng/mL、1ng/mL、0.5ng/mL、0.2ng/mL、0.1ng/mL、0.05ng/mL、0.02ng/mL、0.01ng/mL、0.005ng/mL。

2.2.3 反應模式：80uL樣品直接上樣，反應時間15min-20min；

2.2.4 實驗結果：在彩色乳膠免疫層析平臺，采用此抗體配對組合2測試HMPV M抗原稀釋梯度均顯色，靈敏度可達0.01ng/mL。表明此抗體配對在彩色乳膠免疫層析平臺測試性能良好。

彩色乳膠層析平臺測試抗原示意圖

2.2.5 特異性：分別測試濃度為10ug/mL的腺病毒抗原、合胞病毒抗原、2019-nCOV-SRFc3cho抗原、2019-nCOV-SRHcho抗原，結果均為陰性，表明特異性良好。

彩色乳膠層析平臺測試特異性示意圖

2.3 熒光免疫層析平臺    

2.3.1抗體配對組合3：人偏肺病毒 (hMPV)抗體（貨號：FKY0936D）標記熒光微球+人偏肺病毒 (hMPV)抗體（貨號：FKY0936C）劃膜；

2.3.2 人偏肺病毒（HMPV）M抗原（貨號：EDD0812A）用合適的稀釋液按照理論濃度依次稀釋到50ng/mL、10ng/mL、1ng/mL、0.5ng/mL、0.2ng/mL、0.1ng/mL、0.05ng/mL、0.01ng/mL。

2.3.3 反應模式：80uL樣品直接上樣，反應時間15min-20min；

2.3.4 實驗結果：在熒光免疫層析平臺，采用此抗體配對組合3測試HMPV M抗原稀釋梯度靈敏度可達0.01ng/mL（如表實驗數據所示）。表明此抗體配對在熒光免疫層析平臺測試性能良好。此外，測試濃度為10ug/mL的腺病毒抗原、合胞病毒抗原、2019-nCOV-SRFc3cho抗原、2019-nCOV-SRHcho抗原，結果均為陰性，表明特異性良好。

表1  hMPV抗體配對組合測試數據

測試使用熒光儀器:和邁FIC-S100。    

3.產品信息